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猪伪狂犬gE鉴别诊断ELISA检测试剂盒

猪伪狂犬gE鉴别诊断ELISA检测试剂盒

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猪伪狂犬gE鉴别诊断ELISA检测试剂盒 ,素冉生物提供 DECO品牌,48T/96T,价格优惠,质量稳定,灵敏度高,更精准。素冉提供相关猪牛羊病诊断试剂盒和试纸条,以及相关食品安全监测试剂盒,货期短,常备现货,购买!

  • 产品描述

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猪伪狂犬gE鉴别诊断ELISA检测试剂盒简介:

别名:

英文名称:

规格:48T/96T

单位:盒

储存温度:2-8°C

有效期:6个月

库存状态:素冉现货

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相关酶免ELISA试剂盒操作问题:

一、样本加样方法
1、细胞上清:前处理必须是细胞离心去除,每孔直接加100μl 即可。如果浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释。
2、脑脊液:前处理必须是细胞离心去除,每孔直接加100μl 即可。如果浓度太高需稀释时,用标准品稀释液直接稀释。
3、血清血浆:,请加入50 ul 样本分析缓冲液后加50 ul 标本, 如稀释量大,请将样本与样本分析缓冲液等量加入,不足部分用标准品稀释液补充至100ul。
  A、血清标本应是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;
  B、血浆标本,推荐用EDTA 的方法收集若待测样本不能及时检测,标本收集后请分装,冻存于-20℃,避免反复冻融。
  C、血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂;
  D、标本应清澈透明,检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除。
  E、请勿使用溶血,高血脂或污染的标本检测,否则结果将不准确。
4、组织匀浆液的样本,要制备过程中需要在缓冲液中加入蛋白酶抑制剂,防止蛋白成份被内源性蛋白酶降解,造成检测结果的值偏低。因组织匀浆液的样本蛋白种类多,含量丰富,实验参照血清血浆标本的处理方法进行,否则就会影响实验结果。具体是加入50 ul 样本分析缓冲液后加50 ul 标本,需稀释时,请将样本与样本分析缓冲液等量加入,不足部分用标准品稀释液补充至100ul。因为目标蛋白不同,可能造成降解的蛋白类型可能不一样,如果实验前通过文献确定用哪种蛋白酶抑制剂,有针对性加入,可节省抑制剂。如果查不到相关文献,可采用组合抑制的办法确保蛋白不易被降解。
二、检测范围及灵敏度相关问题
1、不同厂家的试剂盒的检测范围并不相同,一般说来,诊断试剂的检测范围以ng/ml 计。而常见的科研试剂盒中的样本中的目标蛋白,范围可随样本的类型而变化。所以实验前应通过文献和预实验的方法确定样本是否在所购试剂盒的范围内,如果不在检测范围内,分两种情况对待。
   A、如果样本中目标蛋白太低,需找相应灵敏度更高的试剂盒来检测或浓缩 样本;
   B、如果样本中目标蛋白太高,则需要进一步稀释后进行检测
2、灵敏度的问题
一般说来,如果待测样本中目标蛋白的浓度比较高,则对灵敏度要求相对小一些。如果待测样本中目标蛋白的浓度比较低,则必须考虑灵敏度的问题。一般来说,试剂盒曲线上的zui小浓度是比较准确的,低于这个值因为与曲线是个“S”型结构有关,所以结果是有偏差的,是一种估算。再加上实验误差,所以达不到理想的效果。
建议选择试剂盒时,应该看曲线上zui小的浓度值,而不是试剂盒上写的灵敏度。

 

 

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禽病诊断ELISA 检测试剂盒主要有:

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犬狂犬病抗原检测ELISA试剂盒 96T 定量/定性

对于含多个抗原决定簇的大分子蛋白,使用双抗体夹心ELISA模式测定相当简便,现有的商品试剂盒基本上都采用此种测定模式。具体测定方法如下:

    1.首先以双抗体之一于碳酸盐缓冲液中4℃下过夜包被聚苯乙烯等固相,形成固相抗体,洗涤去除未与固相结合或结合不紧的抗体后,用小牛血清或牛血清白蛋白等封闭,洗涤去除未结合的部分及杂质。

    2.加入含待测物的临床样本如血清等,温育一定时间后洗板;此时,待测抗原就会与固相上特异抗体反应而吸附于固相上。

    3.加入酶标记的双抗体之二,温育一定时间后洗板;此时,在固相上即形成双抗体与特异抗原的夹心产物。

4.加入酶底物,温育显色测定

在该测定模式中,有两步温育和板孔洗涤步骤,如果将上述测定步骤2和3并为一步,即将待测样本和酶标抗体同时加入,从而仅有一步温育和洗板过程,即为通常所说的“一步法”。zui初的双抗夹心ELISA试剂盒,均采用两步法。后来,人们为了节省时间,简化操作步骤,试剂生产厂家逐步推出了“一步法”试剂盒。目前在我们的临床实验室中,测定大分子抗原如HBsAg、。FP和hCG等,基本上都采用一步法。一步法相比于两步法,虽然操作简单‘但有其固有的缺陷,处理不好,对ELISA测定结果有严重影响。

    在通常的两步温育洗涤方法中,抗原抗体反应将遵循下述规律,即在*步中加入的待测标本中抗原(Ag)浓度逐步增加时,将使固相抗体(Ab)与抗原的结合逐步达到饱和[(1)式],这样当随后加入一定浓度的酶标抗体(Ab’)后,a复合物的形成将直接与在*步中形成的b复合物相关[(2)式],因此,待测抗原浓度的逐步增加导致了显色的逐步加深,当抗原浓度增加到一定程度时,反应显色达到平台,而呈S形变化曲线

间接法测抗体实际上测定的只有IgG类,而双抗原夹心法所测定的抗体则为所有各类,且不受非特异IgG的干扰,因此,双抗原夹心法测抗体的灵敏度和特异性要高于间接法。目前,为提高抗体测定的灵敏度,国内的间接法ELISA试剂盒正逐步地向双抗原夹心法转变。双抗原夹心法测抗体的模式类似于双抗体夹心法测抗原(图2—7),其操作步骤亦基本相同,也可采用“一步法”,只不过由于机体产生抗体IgG的滴度有限,因而不会有“钩状效应”出现。但为了保证测定的灵敏度和特异性,酶标用抗原应仔细加以选择。


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